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ALPHABIO胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%胰酶) 不含酚红

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%胰酶) 不含酚红

产品编号:E0112
英文名:Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red)

别名:胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)


产品简介

胰酶消化液是一种用于细胞培养中消化细胞的生物制剂。它主要含有胰蛋白酶,能够特异性地水解细胞间的蛋白质连接,使细胞从培养器皿表面脱离并分散成单个细胞,以便进行细胞传代、细胞实验等操作。

主要成分

1.胰蛋白酶(0.25%):是消化液的主要活性成分,负责水解细胞间的肽键。

2.无Ca2+、Mg2+离子及酚红的平衡盐溶液:用于维持消化液的pH值和渗透压,保证胰酶的活性和细胞的生存环境。

3.EDTA(0.02%):与Ca2+或Mg2+离子结合,减少细胞间的粘附性,从而增强胰酶的活性。

储存要求

1.未开封的胰酶消化液应储存于-20℃或更低温度的冰箱中,以保持其活性。

2.避免反复冻融,这可能会导致胰酶活性降低。建议分装冻存,利于长期保存。解冻后可能会出现少量沉淀,属于正常现象,不会影响其使用效力。

3.已开封的消化液,若短期内频繁使用,可储存于4℃冰箱,一年内相对稳定。

使用方法

1.吸去培养液,用适量的无菌PBS轻轻冲洗细胞表面1次,以去除残留的血清和细胞代谢产物,避免这些物质影响胰酶的消化效果。

2.根据细胞培养容器的大小和细胞数量,加入适量的胰酶细胞消化液(含EDTA 0.25%胰酶),至完全覆盖细胞即可。

3.将加入消化液的细胞培养容器置于培养箱中或室温下孵育。在孵育过程中,可不时观察细胞的消化情况。

注:消化时间跟细胞类型、细胞密度、所用血清浓度、胰酶活性、以及消化前细胞培养时间有关。

4.当观察到大部分细胞变圆并开始脱落时,立即加入含有血清的培养基或胰酶抑制剂来终止消化。轻轻吹打细胞悬液,使细胞充分分散成单个细胞。

5.将细胞悬液转移至离心管中,以适当的转速(如800-1500 rpm)离心3-5 min,使细胞沉淀。吸去上清液,根据实验需求,用新鲜的培养基重悬细胞,然后进行细胞计数、传代培养或其他实验操作。


注意事项

1.无菌操作:在使用胰酶消化液的整个过程中,必须严格遵守无菌操作原则,避免污染。使用前,应对消化液的包装和瓶口进行消毒处理,操作应在超净工作台内进行。

2.避免接触皮肤和眼睛:胰酶消化液具有一定的腐蚀性,如不慎接触到皮肤或眼睛,应立即用大量清水冲洗,并及时就医。

3.批次差异:不同批次的胰酶消化液可能在活性上存在一定差异,属于正常现象。

4.观察细胞状态:在消化过程中,要密切观察细胞的形态变化和消化程度,避免消化不足或过度消化。过度消化会导致细胞损伤,影响细胞的后续生长和实验结果;而消化不足则会使细胞难以分散成单个细胞,影响实验操作和细胞计数的准确性。


失效说明

1.观察到消化液有浑浊、沉淀或变色等现象,可能表示消化液已被污染或变质,不能再使用。

2.按照正确的储存条件保存,但超过产品的有效期,建议不再使用。

3.经过多次冻融后,胰酶活性明显降低,即使在有效期内,也可能无法达到预期的消化效果,应考虑更换新的消化液。

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